
ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測(cè)定的重復(fù)性差,這是什么原因造成的?
答:試驗(yàn)的標(biāo)準(zhǔn)曲線和測(cè)定的重復(fù)性差,這是典型的由測(cè)定操作引起的問(wèn)題,常見(jiàn)原因如下:

可能原因:加樣本及試劑量不準(zhǔn);孔間不一致;
解決方法:校正移液器,吸嘴要配套,裝吸嘴時(shí)要緊密。
重復(fù)某一樣品時(shí),加樣時(shí)間盡可能與次接近;
重復(fù)測(cè)定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;樣品稀釋前應(yīng)充分混勻。
可能原因:加樣過(guò)快,孔間發(fā)生污染;
解決方法:重復(fù)測(cè)定標(biāo)本,操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致,以排除這些因素造成的不一致的可能性;加樣不要過(guò)快。
可能原因:加錯(cuò)樣本;
解決方法:加樣槍頭不要貼壁。
可能原因:不同批號(hào)試劑盒中組分混用;
解決方法:檢查記錄和試劑,是否加錯(cuò)樣本。
可能原因:加樣本及試劑時(shí),加在孔壁上部非包被區(qū);
解決方法:不同批號(hào)試劑盒中組分不可混用。
可能原因:溫育時(shí)間、洗板、顯色時(shí)間不一致;
解決方法:檢查時(shí)間是否一致。
可能原因:孔內(nèi)污染雜物;
解決方法:離心樣品,排除雜物。
可能原因:試劑/樣品沒(méi)有混勻;